外泌体来源于机体细胞,可作为天然的生物载体,能进行长距离的细胞间物质输运和信号传递。这种细胞间的通讯在机体的生理和病理过程中至关重要,已被用于多种疾病和中流的zhiliao与组织损伤修复等疾病的研究。主要方法分为 2种:一是某些特殊细胞分泌的外泌体包含有zhiliao作用的有效分子,可将外泌体作为生物药物应用于免疫抑制和活化、血管生成以及组织损伤修复等;另一则是利用工程化改造后的外泌体作为药物载 体将zhiliao药物运送至zhiliao部位。载药外泌体对中流细胞株的抑制作用有剂量依赖性。福建细胞外泌体载药价格比较
外泌体直接载yao方式包括皂苷处理法、孵育法、冻融循环法、超声法和挤出法等。皂苷处理法指共培养外泌体、药物和皂苷溶液,然后通过透析膜、色谱柱纯化得到载药外泌体的方法。孵育法指药物和外泌体在适宜的条件下共培养。冻融循环法是经过冷冻、融化过程使外泌体包裹药物。超声法利用超声波使药物进入外泌体中,挤出法利用挤出机实现外泌体载带药物。其中皂苷辅助药物装载方法是直接载yao方式中常用的一种载yao方式。上述方法也存在一些缺点:孵育法操作简单,但载药量低;冻融循环法、超声法和挤出法对仪器的要求高,且可能会破坏外泌体的质膜结构造成药物泄露,终造成载药量不理想。广东外泌体载药研究进展外泌体对基因类药物的装载方式一般采用电穿孔法和化学转染法。
在药物递送系统中,理想的载体应该是安全、有效,并且有很好的生物利用度。同时,载体的稳定性,低的细胞毒性和免疫原性,以及能否成功地将药物运送到特定的组织或细胞也是至关重要的。外泌体作为药物递送系统具有一系列的优点:(1)从患者的组织或血液收集(如骨髓、单核细胞或巨噬细胞)的外泌体,载药后可以逃避单核吞噬细胞系统(MPS)的qing除,从而减少药物的qing除率。(2)外泌体具有潜在的靶向性,可以增加药物输送到靶组织的能力[10]。(3)外泌体膜的特定脂质体和蛋白质,使得外泌体可以直接与靶细胞膜融合,从而明显提高药物进入细胞的可能性。(4)外泌体载体可以避开内吞途径的内化,而且外泌体的安全性在许多临床试验已经得到证实。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——微流控技术。微流控是利用微纳米级尺寸的管道来处理和操控流体所涉及的一门技术,其在外泌体分离方面的应用受到越来越多学者的关注。Jie等人开发了一种三维纳米结构微流控芯片,微柱阵列通过化学沉积将交叉多壁碳纳米管功能化,然后其就可以识别特定的分子(CD63)并利用独特拓扑纳米材料高效的捕获外泌体。Wunsch等人利用硅工艺生产纳米级确定性侧向位移(Nano-DLD)芯片,得到了均匀的间隙尺寸,该芯片可以灵敏地将20~110nm的颗粒分离。该研究证明了外泌体基于大小的位移,从而揭示了利用芯片分选和量化纳米级生物胶体的潜力。装载了连翘酯苷A(FTA)的A549来源的外泌体可以被A549细胞摄取。
选用来源于生物的天然药物载体细胞外泌体作为DATS的递送载体,具有多种优势:首先,外泌体可以来源于患者自身的细胞,在药物传递过程中减少了免疫原性;其次,外泌体作为一种膜结构载体,与脂质体结构类似,能够通过其表面的膜蛋白与靶细胞膜融合, 将其负载的药物直接运送到受体细胞中,避免了细胞吞噬-溶酶体途径带来的药物降解及细胞毒性等问题;此外,不同来源的外泌体因其供体细胞的差异性而呈现出不同的特性。在使用外泌体装载DATS来研究抗中流转移作用中选用外泌体的供体细胞为肺转移中流细胞B16BL6,研究表明,中流细胞外泌体的产生和释放比正常细胞明显升高,并带有宿主细胞独特的性质。外泌体可以通过细胞内吞的方式将紫杉醇释放到受体细胞中,提高药物对供体中流细胞的毒性。湖北细胞样本外泌体载药参考价格
药物载入到外泌体中的方式可分为两种,即外源性载yao方式和内源性载yao方式。福建细胞外泌体载药价格比较
PTX是一种天然的抗中流药物, 已在临床上广fan应用, 但因其句有剂量依赖性毒性、水溶性差和静脉注射zhiliao效果较差等问题限制了PTX使用。在异种中流移植的裸小鼠肺ai模型中, 使用牛奶来源的外泌体作为PTX的药物载体, 经口服给药结果显示, 负载PTX的外泌体句有良好的耐酸性和稳定性, 能明显抑制中流的生长, 并且较静脉给药明显降低了药物本身毒性与免疫反应。有实验利用超声引导巨噬细胞来源外泌体装载PTX, 发现外泌体载药组较传统给yao方式对P-gp阳性耐药细胞的细胞毒性增加了50倍以上, 对Lewis肺ai自发转移模型句有很强的杀伤作用, 说明以外泌体为载体的PTX句有改善化疗药物耐药性, 增强抗ai效果的潜能。福建细胞外泌体载药价格比较